پیش نمایشِ،تعدادی از اسلایدهای پاورپوینت
پاورپوینت بسیار زیبا 👌 واکنش زنجیره ای پلیمر از PCR با موضوعات: PCR، کاربرد PCR، پرایمر، ویژگی های یک پرایمر خوب، موارد مورد نیاز برای PCR، اجزای واکنش pcr، روش های PCR، بایدها و نبایدها در PCR
قسمتی از محتوای پاورپوینت واکنش زنجیره ای پلیمر از PCR
یک روش آزمایشگاهی برای ساخت تعداد زیادی نسخه از قطعات DNA از یک نمونه بسیار کوچک حاوی مـواد ژنتیکی استفـاده می شود DNA از 2 رشته مارپیچ با پیوندهای هیدروژنی بین 4 تا باز آلی نوکلوئیدیA,T و C,G تشکیل شده که منجر به ارایش ژنتیکی مخصوص به خود افراد می شود . حدود 25000 ژن در ژنوم انسان وجود دارد که بیان این ژن ها منجر به تولید پروتئین می شود.
PCR در 3 مرحله به وسیله ی ترموسایکلر انجام می شود
- مرحله 1– رشته جدا شده DNA کمی خنک شده وپس پرایمر 2 قطعه کوتاه تک رشته ای دقیقاً مشابه به دو طرف قطعه مورد نظر طراحی و ساخت
- مرحله 2- آنزیم DNA پلیمر از توالی DNA را در هر نیمه اصلی و نیمه جدید پلیمر از تشکیل شده است .
- مرحله 3- مجدداً با افزایش دما رشته ها از هم جدا سپس مرحله خنک شدن و افزودن پرایمر و تک پلیمراز تا 4 رشته DNA تشکیل نشود.
کاربرد PCR
این فرآیند به صورت خودکار انجام می گیرد به طوری که یک میلیارد DNA اولیه می تواند ظرف چند ساعت تولید شود.این روش برای شناسایی ژن های خاص مثل ژن سرطانی ، بیماری لایم، سیاه سرفه ، HPV ،کلامیدیا و پیگیری پیوند استفاده می شود
تعیین جنسیت جنین ، تهیه نسخه متعدد از یک ژن تشخیص بیماری عفونی ، سل ، تولید و طراحی واکسن انسانی و دامی ، تشخیص بیماری و اختلالات ژنتیکی.
- پرایمر: مکمل ژنی که می خواهیم تکثیر کنیم
- Pcr را می گذارند در دستگاه ترمو سایکلر
- Mgcl2 : آنزیم های پلی مر از و آنزیم های که با اسید نوکلوئیک سروکار دارند یا سوبسترای آن اسید نوکلوئیک است کوفاکتور این آنزیم ها Mgcl2 است.
- Cofactor : co به معنی کمک است ( افزایش دهنده) واکنش آنزیم ها را تشدید می کند.
- تمام آنزیم هایی که با اسید نوکلوئیک سروکار دارند مثل DNA پلی مر از ، نوکئاز برای عمل کردن نیاز به یون mg دارند.
باکتری در PCR
- Taq باکتری گرما دوست از چشمه های اب گرم گرفته شده است.
- جهش ایجاد می کند و می تواند مشکل ژنتیکی ایجاد کند و ممکن است از نظر عملکردی در پروتئین تأثیر بگذارد ، برای همین از Taq فقط در PCR استفاده می شود.
- منظور از Setup کردن PCR هم غلظت واکنش هاست و هم در دما و زمان