پاورپوینت دستگاه ریل تایم PCR

نمایش بیشتر

پاورپوینت بسیار زیبا 👌 دستگاه ریل تایم PCR با موضوعات : اصطلاحات موجود در دستگاه، کاربردهای PCR، اصول کار PCR، مراحل کار، روش‌های شناسایی، آنالیزهای کمی در Real time PCR، منحنی ذوب، تشخیص پلی مرفیسم توسط Real time PCR، مراحل آزمایشگاهی PCR، مراحل نموداری PCR، نتیجه گیری

قسمتی از محتوای پاورپوینت دستگاه Real Time PCR

PCR مخفف Polymerase chain reaction ، به معنی واکنش زنجیره ای پلی مراز می باشد. هدف از آن سنتز رشته های DNA جدید از روی رشته های الگو است که به صورت زنجیر وار تکرار می شود PCR.دارای انواع متعددی می باشد یکی از آنها  Real Time PCR  است.

Real Time PCR تکنیکی برای مشاهده بی وقفه ی پیشرفت واکنش PCR در طول زمان می باشد. همچنین با این روش می توان مقادیر تولیدات PCR را نیز اندازه گیری نمود.

اصطلاحات موجود در دستگاه ریل تایم 

• Standard Curve: منحنی استاندارد جهت آنالیزهای کمی
• CT: به اولین چرخه‌ای که شدت فلورسنت بیشتر از خط پایه (Threshold)باشد چرخۀ آستانه یا CT گویند
• Baseline: خط زمینه، جایی که هیپ گونه نور فلورسنتی قابل ثبت نیست.
• Amplification plot: نموداری که در آن تعداد چرخه ها در مقابل شدت فلورسنت رسم می شود.

کاربردهای PCR

• سنجش بیان ژن (Gene Expression )
• تعیین ژنوتیپ (Genotyping )
• ارزیابی تعداد نسخه های یک ژن (Gene copy number )
• تشخیص انواع پاتوژنها در بیماری ها
• اسکن ژن وشناسایی جهش ها (Gene Scaning )
• تشخیص بیماریهای ژنتیکی

اصول کار PCR

تمامی اصول و واکنش‌گرهایی که برای یک RT-PCR معمولی نیاز است دراین تکنیک هم بکار می‌رود اما یک گزارشگر فلورسنت نیز در واکنش حضور دارد. این گزارش‌گرها به گونه‌ای طراحی می‌شوند که در صورت تکثیر DNA نور تولید کنند.

لذا افزایش شدت نور ثبت شده در دستگاه با میزان محصول بدست آمده نسبت مستقیم دارد.با ادامه یافتن PCR شدت فلورسنت رو به افزایش می‌گذارد.

روش Real time PCR می تواند به دو صورت انجام پذیرد:

1-One step: همزمان در یک واکنش ساخت cDNA  ازRNA و تکثیر آن صورت می گیرد

2-wo step: ابتدا ساخت cDNA و در واکنش دیگر تکثیر آن